Caracterización molecular y análisis filogenético de Tripanosomas aislados de Quirópteros en el departamento del Tolima utilizando la SSU ADNr, ITS1 y CATL

Resumen

Reportes recientes registran el aislamiento de nuevas especies y genotipos de tripanosomas en quirópteros de América Latina. Para contribuir al conocimiento de los tripanosomas que circulan en los quirópteros de diferentes municipios del departamento del Tolima, se utilizaron las técnicas moleculares basadas en PCR específico y secuenciamiento de ADN de las regiónes V7-V8 de la SSU ADNr, ITS1 del cistrón ribosomal y CATL para determinar las especies, los genotipos circulantes y su filogenia. Los quirópteros fueron capturados utilizando redes de niebla. Cada individuo fue determinado por taxonomía tradicional, posteriormente fueron sedados para tomar una muestra de sangre que se sembró en medio de cultivo bifásico (NNN-LIT) y posteriormente el animal fue liberado. Una alícuota de sangre fue almacenada en etanol al 70% para la obtención de ADN y efectuar la determinación molecular de los quirópteros muestreados. Los medios de cultivo fueron examinados microscópicamente cada semana para verificar la presencia de flagelados. Los aislados positivos fueron sometidos al procedimiento de extracción de ADN por el método FCAI y posteriormente fueron aplicadas las técnicas moleculares. Los resultados de la caracterización molecular mostraron la presencia de 3 especies de tripanosomas: Trypanosoma cruzi, T. cruzi marinkellei y T. rangeli en 4 especies de quirópteros: Phyllostomus discolor, P. hastatus, Artibeus lituratus y Carolia perspicilata. De igual manera, los análisis filogenéticos permitieron realizar inferencias acerca de la ubicación filogenética de los aislados respecto a las cepas control.