Page 12 - Revista 2019
P. 12
Revista de la Asociación Colombiana de Ciencias Biológicas
issn impreso 0120-4173, issn en línea 2500-7459
bajos niveles de variación. realizó el respectivo enjuague con agua destilada.
La micropropagación permite la reproducción de miles Fase de laboratorio
de plantas por metro cuadrado y tiene la ventaja de que,
si el ejemplar parental es sano, todas las plantas que se La fase experimental se llevó a cabo basándose en las
produzcan a partir de él, son sanas. Además, permite etapas descritas por Murashige y Skoog (8). Las cuales
adquirir descendencia genéticamente similar. Esto ase- son: Establecimiento aséptico del material, multiplica-
gura la homogeneidad de la producción (7). ción y enraizamiento, para cada una de estas etapas se
describe el procedimiento a seguir.
Es así, como el campo de la biotecnología ha brindado
una excelente herramienta, como es la micropropaga- Fase de establecimiento.
ción, para producir grandes cantidades de plántulas que
consigan abastecer viveros y cultivos en proporciones En la etapa de establecimiento se utilizó el medio Mu-
tan amplias como la demanda. rashige y Skoog 100% (8), adicionado con myo-inositol
0,1mg/L, ácido ascórbico 0.1mg/L, tiamina 2mg/L, sa-
Los estudios en rosas en cultivo de tejidos vegetales carosa 30g, benzylaminopurina (BAP) 4mg/L, kinetina
son escasos, por lo cual este trabajo plantea establecer 3mg/Ll, ácido indol-acético (AIA) 3mg/L, y Agar sig-
cultivos in vitro de Rosa sp a partir de yemas axilares, ma 6 g; ajustando el pH a 5,8. Los medios de cultivo
evaluar concentraciones de hormonas para la fase de ca- fueron esterilizados en autoclave a 120°C bajo 15 lb de
llogénesis para posteriores investigaciones. presión.
Materiales y Métodos En condiciones asépticas dentro de la cámara de fl ujo
laminar con la ayuda de pinzas y bisturí, se procedió
Área de estudio a extraer los primeros primordios, para posteriormente
introducir una yema en cada frasco (100 unidades de
La investigación se realizó en el laboratorio de cultivo explantes) los cuales contenían 20 ml del medio de cul-
in vitro de tejidos vegetales de la Facultad de Ciencias tivo gelifi cado con Agar-Agar, estos se conservaron en
Agroindustriales de la Universidad del Quindío. la cámara de crecimiento a una temperatura de 25°C
bajo luz blanca fl uorescente, hasta su brotación.
Selección del material
Después del establecimiento se hizo un seguimiento se-
El material vegetal de Rosa sp fue seleccionado de manal y se tomaron los siguientes datos.
acuerdo a los siguientes criterios • Número de explantes vivos
• Tallos de rosa sanos y vigorosos • Número de brotes
• Tallos con presencia de yemas axilares • Contaminación
Este material fue suministrado por el vivero las “Matas” Multiplicación y enraizamiento
ubicado en el kilómetro 3 vía Armenia – Circasia.
Una vez obtenido los brotes se realizó la multiplicación
Una vez seleccionadas las yemas axilares se procedió a de los explantes; se pasaron al medio de multiplicación,
realizar la desinfección: lavado en solución de hipoclo- agregando BAP y ANA, teniendo así dos tratamientos
rito de sodio comercial al 10 v/v durante 10 minutos, se- (Tabla 1).
guido de un enjuague de 2 minutos con agua destilada,
inmersión en una solución de etanol al 70 v/v durante En cada tratamiento se colocaron 20 brotes con una al-
10 minutos, se realizó un enjuague de 2 minutos con tura promedio de 5 mm para un total de 40 brotes.
agua destilada; después se sumergieron en hipoclorito
de sodio al 5 v/v durante 5 minutos, seguido de un en-
juague de 2 minutos con agua destilada; fi nalmente se
sumergieron en Tween al 5% durante 5 minutos y se
12
Rev. Asoc. Col. Cienc.(Col.), 2019; 31: 10-17.