Page 13 - Revista 2019
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Establecimiento in vitro y callogénesis de Rosa (rosa sp.). Villa & Arbeláez.


         Tabla1. Hormonas a evaluar para la fase de multiplicación y  varianza descriptivo; y se evaluaron las siguientes va-
         enraizamiento                                      riables
                                                            •   Número de explantes vivos
               Tratamiento A            Tratamiento B
                                                            •   Número de brotes
          Murashige y Skoog 100%,  Murashige y Skoog 100%,
                                                            •   Número de explantes contaminados.
          BAP 2 mg /L+ ANA 3 mg/L BAP 3 mg/L+ ANA 1mg /L
          Agar 5,6 g              Agar 5,6g                 Para la fase de multiplicación, enraizamiento y obten-
          Azúcar 30 g             Azúcar 30g                ción de callo se empleó una Anova en donde se evaluó
                                                            el enraizamiento, número de hojas y producción de ca-
         En esta etapa se evaluaron                         llogénesis
         •   Altura
         •   Número de hojas                                Para  la  callogénesis  se  empleó  un  diseño  estadístico
         •   Formación raíz.                                completamente al azar, los datos fueron analizados con
                                                            el software SPSS (SPSS Statistics 17) utilizando el test
         Establecimiento de Callogénesis a partir de hoja   de varianza Anova y las diferencias entre las medias se
                                                            determinaron mediante el test Tukey (p ≤0,05).
         Para el establecimiento de callo se tomaron muestras
         de hojas de rosa. Estas fueron previamente lavadas con  Resultados
         agua y jabón: Se les realizó el siguiente protocolo de
         desinfección: 10 minutos en agua con hipoclorito co-  Establecimiento yemas axilares de Rosa sp
         mercial al 5 más 2 gotas de Tween, se lavaron y se su-
         mergieron en alcohol al 70, se lavaron y se dejaron 5  Esta etapa se realizó un conteo del comportamiento de
         min en hipoclorito al 5, luego en cabina se realizó un  cada uno de los explantes de yemas axilares de Rosa
         último  enjuague  y  se  cortaron  porciones  de  hojas  de  sp., en cuanto al número de explantes con brote, sin bro-
         3mm2, en total se seleccionaron 20 explantes para cada  te y contaminación (Fig. 1 y 2)
         tratamiento (tabla 2).

         Tabla 2. Hormonas a evaluar para fase de formación de callo
         a partir de hoja
               Tratamiento 1            Tratamiento 2
          Murashige y Skoog 100%,  Murashige y Skoog 100%,
          BAP 2 mg/L + 5 mg 2,4-D  BAP 2 mg/L + 5 mg piclo-
                                  ram
          Agar 5,6 g              Agar 5,6g
          Azúcar 30 g             Azúcar 30g
          pH 6,0                  pH 6,0
                                                            Figura 1. Fase de establecimiento de explantes de Rosa sp a
                                                            partir de yemas axilares
         Las hojas sembradas para cada tratamiento se colocaron
         en cuarto de crecimiento con 12 horas de luz (intensidad
         de luz de 60 μmolm–2s–1) a 25±1oC de temperatura.


         Se cuantifi có el número de explantes que formaron ca-
         llo en los distintos tratamientos, durante las primeras 4
         semanas de cultivo (30 días).


         La variable a evaluar fue:
         •   Formación de callo

         Análisis de los datos                              Figura. 2. Variables medidas (Explantes vivos, Número de
         Para la fase de establecimiento se realizó un análisis de  brotes, Contaminación) para fase de establecimiento.


                                                                                                          13
         Rev. Asoc. Col. Cienc.(Col.), 2019; 31: 10-17.
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