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Anticuerpos anti nucleares en enfermedades reumáticas. Rosales & Sosa
Existen publicaciones científi cas realizadas en diferen- -20ºC hasta el momento de su uso.
tes países que han evaluado el grado de correlación o
concordancia de los test de laboratorio de inmunofl uo- Análisis estadístico. - El presente estudio fue de tipo
rescencia indirecta e inmunoblot para la detección de transversal descriptivo. El análisis de datos se realizó
anticuerpos anti nucleares y/o citoplasmáticos; en fun- con ayuda de la base de datos Excel 2013. Los resulta-
ción del lugar del estudio realizado y de la marca de los dos de los análisis de las variables continuas se expre-
estuches comerciales que fueron empleados en dichos saron como porcentaje, media y rango.
estudios, los valores de correlación y concordancia ob-
tenidos varían de un estudio a otro. Debido a que los Para datos no apareados de acuerdo a las características
perfi les característicos de los autoanticuerpos se en- de cada test se empleó (Chi Cuadrado). Para medir la
cuentran en diferentes enfermedades, la determinación concordancia de frecuencias de las variables cualitativas
de la especifi cidad ayuda a establecer el diagnóstico se utilizó índice de Kappa de Cohen clasifi cándose los
correcto y facilita el tratamiento y seguimiento al pa- niveles de concordancia de la siguiente manera: (0,00
ciente. Algunos de estos anticuerpos son indicadores Pobre), (0,001-0,20 Defi ciente), (0,21-0,40 Aceptable),
muy sensibles de una determinada enfermedad y otros (0,41-0,60 Moderada), (0,61-0,80 Considerable), (0,81-
anticuerpos son más específi cos. (9-12). 1,00 Casi perfecta).
El objetivo principal de este estudio fue correlacionar Aspectos bioéticos. – El protocolo de estudio fue apro-
los niveles de anticuerpos antinucleares obtenidos por bado por el Comité de Ética de la Investigación de la
las técnicas de FANA y ANA-LIA en pacientes diag- Universidad Mayor de San Andrés, La Paz – Bolivia
nosticados o con sospecha clínica de enfermedades au- (registro CEI-UMSA 0416), todos los pacientes invo-
toinmunes. lucrados en el estudio dieron consentimiento y asenti-
miento informado para el procesamiento de muestras y
MATERIAL Y METODOS uso de datos de forma confidencial.
Descripcion de la poblacion
1. Criterios de inclusión Pruebas de inmunofl uorescencia indirecta.- Los
Grupo caso. - Pacientes que asistieron al Instituto SE- FANA fueron determinados siguiendo las instrucciones
LADIS, con sospecha clínica de alguna enfermedad au- del fabricante del estuche comercial (Orgentec, Alema-
toinmune. nia), la prueba utilizó como sustrato improntas de célu-
las cancerígenas HEp-2 y anticuerpos anti IgG humano
Grupo control. - Personas que no presenten anteceden- conjugado con FITC, las muestras fueron procesadas a
tes clínicos de alguna enfermedad autoinmune y sin an- simple siego según se indica.
tecedentes familiares de enfermedad autoinmune, per-
sonas que no estén cursando enfermedades infecciosas Las muestras fueron evaluadas a las diluciones 1:40,
y que no se estén administrando medicamentos. 1:80 y 1:160, diariamente se incluyeron controles posi-
tivos y negativos (proporcionados por el estuche comer-
2. Criterios de exclusión cial). Se sembró 30 µl de las dilución correspondien-
Pacientes de quienes no contaban con expediente clíni- te y de los controles en los pocillos de las placas con
co completo o que pese a dar su consentimiento infor- sustrato celular, se incubó por 30 minutos en cámara
mado para el estudio no asistieron a la toma de muestras húmeda a temperatura ambiente. Luego, para remover
los anticuerpos no sensibilizantes se lavaron las placas
Tamaño de muestra. - Se incluyeron muestras de 100 cuidadosamente con pizeta y se sumergieron en PBS
pacientes con sospecha clínica de alguna enfermedad por 10 minutos. Posteriomente, las placas se secaron
autoinmune, quienes acudieron al Laboratorio de His- y llevaron a camara humeda, se añadió a cada pocillo
tocompatibilidad e Inmunogenética del Instituto SELA- 30 µl de anticuerpo IgG conjugado con isotiocianato de
DIS entre los meses de junio 2018 y agosto del 2019, a fl uoresceina e incubó en oscuridad por 30 minutos. Para
los cuales se les realizaron las siguientes determinacio- eliminar los anticuerpos conjugados que no se unieron
nes serológicas: FANA y ANA-LIA. a los anticuerpos sensibilizantes se lavaron las placas
Naturaleza de la muestra. - Muestra de sangre venosa. nuevamente como se mencionó previamente. Se añadio
A los participantes se les colectó 5ml de sangre venosa, a cada pocillo una gota del medio de montaje previsto
a partir de la cual se obtuvó el suero que fue guardado a por el estuche comercial y se cubrio la paca con cubre
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Rev. Asoc. Col. Cienc.(Col.), 2020; 32: 143-153